血浆M-CSF、MMP9、TIMP-1水平及HPV阳性大鼠宫颈癌增殖能力的关系研究

目的:探究血浆巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)、基质金属蛋白酶9(Matrix metallopro-teinase 9,MMP9)及其组织抑制因子 1(tissue inhibitor of the metalloproteinases,TIMP1)水平及人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)阳性大鼠宫颈癌增殖能力的关系.方法:20只健康雌性Wistar白化大鼠根据实验目的分为两组:对照组(异种移植时注射SiHa细胞作为对照实验,n=10)和观察组(将转染sh-M-CSF、sh-MMP9和sh-TIMP-1的SiHa细胞注射大鼠的子宫颈,n=10).通过ELISA测定大鼠血浆M-CSF、MMP9和TIMP-1的水平.通过PCR检测实验大鼠中M-CSF、MMP9和TIMP-1的mRNA表达.使用数字游标卡尺分析大异种移植大鼠肿瘤体积生长.第3、4、5周分别处死并切除大鼠肿瘤进行称重.通过免疫组织化学分析肿瘤组织中增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、pAKT和pSTAT3的蛋白表达.通过免疫组织化学染色和TUNEL染色分别确定Ki67阳性细胞数量及凋亡细胞数量.结果:观察组较对照组M-CSF、MMP9和TIMP-1的水平降低(P＜0.05).观察组较对照组M-CSF、MMP9和TIMP-1的mRNA表达降低(P＜0.05).随着时间的增加,两组大鼠肿瘤体积均增加.1周和2周对照组和观察组大鼠肿瘤体积比较无差异(P＞0.05),第3周、第4周和第5周,观察组较对照组大鼠肿瘤体积降低(P＜0.05).观察组较对照组大鼠体内肿瘤重量减少(P＜0.05).观察组较对照组PCNA、pAKT和pSTAT3的蛋白表达量降低(P＜0.05).观察组较对照组Ki67阳性细胞数量降低,凋亡细胞升高(P＜0.05).结论:降低血浆M-CSF、MMP2和TIMP1水平可促进HPV阳性大鼠宫颈癌细胞凋亡,有效抑制细胞增殖.