柴胡皂苷D对大鼠免疫性肝纤维化的保护作用及其机制研究

目的 结合网络药理学分析与动物实验验证,探讨柴胡皂苷D(saikosaponin D,SSD)对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化的保护作用及机制.方法 网络药理学分析方法获得SSD与自身免疫性肝病的潜在靶点,利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用网络图.利用DAVID数据库对潜在靶点进行KEGG通路富集分析.制备大鼠免疫性肝纤维化模型,SSD干预后ELISA检测大鼠血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-18水平,HE染色观察大鼠肝脏病理改变,Western blot检测大鼠肝脏组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、TLR4、Myd88、p65及p-p65蛋白的表达.结果 通过筛选获得SSD与自身免疫性肝病的潜在靶点177个,KEGG富集分析得到与免疫系统相关的通路主要包括NOD样受体信号通路等,获得潜在靶点在NOD样受体信号通路中的富集情况.实验研究显示与模型组比较,高剂量SSD可显著降低大鼠血清中ALT和AST水平(P＜0.05);病理组织学检测显示SSD可显著改善大鼠肝脏纤维化程度,减轻肝脏损伤;ELISA检测显示中、高剂量SSD可显著降低大鼠血清中TNF-a、IL-1β 和 IL-18 的水平(P＜0.05);Western blot 检测显示 SSD 可明显下调 NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、TLR4、Myd88和p65蛋白的水平,并抑制p65的磷酸化.结论 SSD能减少免疫性肝纤维化大鼠血清中炎性因子释放、减轻肝脏细胞损伤,其机制可能与调控TLR4/NF-κB和NLRP3炎症小体信号通路有关.