纳米细菌在肾结石形成过程中的作用研究

目的 探究纳米细菌(NB)损伤人肾小管上皮细胞HK-2并导致晶体滞留的机制.方法 应用肾结石患者尿液培养的NB,实验分为5组:对照组(胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、NB组(NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、COM组(一水草酸钙,COM悬液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)、nHAP组(纳米级羟基磷灰石,nHAP、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞)和四环素干扰组(TET+NB,四环素、NB菌液、胎牛血清、1640培养液+HK-2细胞).将HK-2细胞分别与各组作用物共培养6、12、24 h后,用光学显微镜观察HK-2细胞的形态学变化;超声粉碎细胞后检测Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量.结果 HE结果可见,nHAP组和四环素干扰组中HK-2细胞的损伤程度明显低于NB组(P<0.05).共同培养12、24 h后,NB组和COM组Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均低于对照组,H2O2含量均高于对照组(P<0.05),nHAP组Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均低于对照组(P<0.05),四环素干扰组Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均高于NB组(P<0.05).共同培养6、12、24 h后,NB组和COM组MDA含量均高于对照组(P<0.05),四环素干扰组MDA含量均低于NB组(P<0.05);COM组LDH含量均高于对照组(P<0.05),nHAP组、四环素干扰组LDH含量均低于COM组(P<0.05).结论 HK-2细胞损伤的原因可能是NB通过诱导脂质过氧化反应造成的,NB作用时间越长,损伤程度越重.四环素在一定程度上可以阻止NB对HK-2细胞的损伤.