慢病毒介导eIF3b-shRNA对裸鼠MCF-7乳腺癌移植瘤的抑制作用

目的:探讨慢病毒介导eIF3b-shRNA对裸鼠乳腺癌移植瘤生长、增殖及转移的影响.方法:利用慢病毒介导eIF3b-shRNA转染MCF-7乳腺癌细胞,建立裸鼠乳腺癌模型,裸鼠分成三组,每组5只:Ⅰ组(接种转染eIF3b-shRNA的MCF-7乳腺癌细胞)、Ⅱ组(接种转染空载体的MCF-7乳腺癌细胞)和Ⅲ组(接种正常MCF-7乳腺癌细胞).观察制瘤成功后裸鼠肿瘤体积生长、HE染色镜下观察移植瘤组织和肺组织,并应用实时荧光定量PCR法检测eIF3b mRNA表达,Western blot印迹法检测eIF3b、增殖标记蛋白Ki-67及迁移标记蛋白MMP-9的表达.结果:三组裸鼠成瘤后,不同时间点对三组裸鼠进行观察,Ⅰ组肿瘤体积均明显小于Ⅱ组与Ⅲ组(P＜0.05),而Ⅱ组与Ⅲ组之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).实时荧光定量PCR法检测结果显示:Ⅰ组裸鼠移植瘤组织中eIF3b mRNA相对表达量明显下降,明显低于Ⅱ组和Ⅲ组,差异具有统计学意义(P＜0.05),而Ⅱ组和Ⅲ组之间eIF3b mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05)o Western blot印迹法检测结果显示:Ⅰ组裸鼠移植瘤组织中eIF3b、增殖标记蛋白Ki-67和迁移标记蛋白MMP-9相对表达量较Ⅱ组和Ⅲ组显著下降,差异具有统计学意义(P＜0.05),而Ⅱ组和Ⅲ组之间各蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).解剖三组裸鼠,大体肉眼观察发现Ⅱ组和Ⅲ组的肺组织切开可见多灶灰白小结节,而Ⅰ组裸鼠肺组织中未找到明显结节.镜下观察发现,Ⅱ组和Ⅲ组裸鼠肺泡组织中灰白小结节为腺管样异型细胞呈结节样生长,而Ⅰ组镜下见肺泡组织结构正常,未找到转移灶.结论:慢病毒介导下调eIF3b表达对乳腺癌细胞在裸鼠体内的移植瘤生长、增殖及肺转移有明显抑制作用.