松材线虫Bx-TIMP克隆及功能研究

为探究Bx-TIMP基因在松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)致病过程中的功能,对Bx-TIMP基因进行克隆及分析,并验证基因沉默后松材线虫致病性变化.PCR法克隆Bx-TIMP,应用TMHMM 2.0 server和SignalP 4.1 Server分析该基因编码蛋白质的跨膜结构域和信号肽;应用原位杂交技术确定该基因在松材线虫体内表达部位;应用RNAi技术,分析沉默该基因后松材线虫对红松(Pinus koraiensis)致病性变化.该基因CDS区全长363 bp,编码120个氨基酸,编码蛋白具有跨膜结构域及信号肽.原位杂交表明该基因在松材线虫食道腺中表达.基因沉默后,松材线虫对红松致病性减弱.结果表明,Bx-TIMP为效应因子基因,与松材线虫致病性相关.本研究揭示Bx-TIMP基因是松材线虫危害松树致使其发病的关键基因,为进一步明确松材线虫致病机理提供理论依据,为研发松材线虫的防治技术奠定理论基础.