FTO诱导TSG-6 mRNA去甲基化对瘢痕疙瘩的影响

目的 探讨去甲基化酶肥胖相关蛋白(FTO)调控肿瘤坏死因子-α刺激基因-6(TSG-6)mRNA去甲基化在瘢痕疙瘩组织中的表达及其在瘢痕形成中的作用.方法 选取新鲜瘢痕疙瘩组织(实验组)和正常皮肤组织(对照组),应用细胞免疫荧光方法检测TS G-6在实验组和对照组中的表达水平;构建表达TSG-6 mRNA正义和反义链探针用于RNA pulldown,随后用N6-甲基腺嘌呤(m6 A)抗体对各组样本进行Western blot检测;应用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)和Western blot检测实验组和对照组中TSG-6 mR-NA去甲基化酶和甲基化酶的表达;应用细胞免疫荧光方法检测FTO在实验组和对照组的表达水平.结果 细胞免疫荧光结果显示,实验组中TS G-6表达水平低于对照组(P<0.01);生物素标记TSG-6 RNA pulldown实验结果显示,实验组中TSG-6 mRNA的m6 A表达水平低于对照组(P<0.01);qPCR实验结果显示实验组中FTO mRNA表达水平高于对照组(P<0.01);Western blot实验结果显示实验组中FTO蛋白表达水平高于对照组(P<0.001);细胞免疫荧光结果显示实验组FTO表达水平高于对照组(P<0.001).结论 去甲基化酶FTO催化TSG-6 mRNA去甲基化,进而促进瘢痕疙瘩的形成,这可能为瘢痕疙瘩的临床治疗提供新的思路和方向.