LPA在小鼠矽肺模型的表达及其对小鼠肺上皮细胞EMT影响

目的 探究溶血磷脂酸(LPA)在小鼠矽肺模型中的表达及其对小鼠肺上皮(MLE-12)细胞上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 20只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和模型组,对照组每天给予0.9％氯化钠溶液,模型组采用鼻腔滴注100 mg/L二氧化硅(SiO2)悬浊液50μl,连续7 d,在第28天时处死,取部分肺组织,免疫组化观察溶血磷脂酸1型受体(LPAR1)的表达,Western blot检测平滑机动蛋白α(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)和LPAR1的蛋白表达;细胞增殖实验检测SiO2对MLE-12细胞的增殖能力;细胞划痕实验检测SiO2对MLE-12细胞的迁移能力;将MLE-12细胞分为对照组、SiO2刺激组和抑制剂组,Western blot检测LPAR1和EMT相关蛋白的表达水平.结果 Western blot检测显示模型组小鼠肺组织内α-SMA和COLⅠ表达增高,模型建立成功;免疫组化显示在模型组小鼠气管支气管周围上皮细胞内LPAR1表达阳性,呈现亮棕色;Western blot检测显示模型组小鼠肺组织内LPAR1的蛋白含量表达高于对照组(P<0.05);细胞增殖实验和划痕实验检测显示SiO2能够促进MLE-12细胞的增殖和迁移;Western blot检测显示SiO2刺激组LPAR1和间质标志物Vimentin蛋白表达增高(P<0.05),而上皮标志物E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05),且与对照组和抑制剂组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 LPA在小鼠矽肺模型中表达增高,并通过调控MLE-12细胞EMT过程促进其增殖、迁移,加速疾病的进展.