抑制喉癌细胞瞬时受体电位M7表达对细胞生物学行为的影响及其机制

目的 探讨干扰瞬时受体电位M7(TRPM7)对喉癌细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响及其机制.方法 体外培养人喉癌TU212细胞,分别构建3组TRPM7-shR-NA(TRPM7-shRNA1、TRPM7-shRNA2、TRPM7-shRNA3组)及阴性对照shRNA-NC(shRNA-NC组)质粒载体,并以脂质体转染法转染TU212细胞,以转染空载体的细胞作为Con-trol组.采用ELISA法检测TU212细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,比色法检测上清液中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;使用CCK-8实验、克隆形成实验和Transwell实验检测敲低TRPM7表达对TU212细胞增殖、侵袭的影响;使用Western blot检测TU212细胞侵袭、凋亡相关蛋白表达.结果 转染后,与Control组比较,TR-PM7-shRNA1组、TRPM7-shRNA2组和TRPM7-shRNA3组的TRPM7 mRNA和蛋白表达水平均下调(P<0.05),且以TR-PM7-shRNA1组下调最多(P<0.05).功能实验中,与Con-trol组比较,TRPM7-shRNA1组TU212细胞培养上清液中SOD水平降低(P<0.05),MDA、LDH水平升高(P<0.05);细胞增殖倍数减少、克隆形成率降低(P<0.05);细胞侵袭数减少(P<0.05),N-cadherin、Vimentin蛋白表达下调(P<0.05);线粒体膜电位降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、cleaved caspase-3/caspase-3比值增加(P<0.05).结论 敲低TR-PM7增加喉癌TU212细胞氧化应激水平,抑制TU212细胞增殖、侵袭,并通过线粒体途径诱导其凋亡.