LncRNA XIST通过调控miR-140-3p/PD-L1轴促进弥漫大B细胞淋巴瘤细胞的增殖与迁移

目的 探讨LncRNAX失活特异性转录本(XIST)通过miR-140-3p/程序性死亡配体-1(PD-L1)轴对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、迁移的影响.方法 以2015年至2017年期间我科室收治的40例DLBCL患者的淋巴结活检组织标本,以及人DLBCL细胞系OCI-LY19、SU-DHL-4、U2932为研究对象,qRT-PCR检测XIST表达,分析XIST表达与DLBCL患者临床病理特征的关系;利用Lipofectamine?2000转染试剂对U2932细胞进行转染,分组为:空白组、miR-NC组、miR-140-3p mim-ics 组、OE-NC 组、OE-XIST 组、OE-PD-L1 组、OE-XIST+miR-NC 组、OE-XIST+miR-140-3p mimics 组、OE-XIST+si-NC 组、OE-XIST+si-PD-L1组,qRT-PCR检测各组细胞中miR-140-3p及XIST表达水平;MTT法检测各组细胞增殖情况;Transwell实验检测各组细胞迁移情况;双荧光素酶报告基因检测实验分别验证XIST与miR-140-3p、miR-140-3p与PD-L1的靶向关系;West-ernblot检测各组细胞中PD-L1蛋白表达.结果 XIST在DLBCL组织和细胞OCI-LY19、SU-DHL-4、U2932中高表达,且U2932细胞中XIST的表达水平最高,因此后续实验以U2932细胞为研究对象;XIST的表达与DLBCL患者的Hans分型有关,而与DLBCL患者的性别、年龄、Ann Arbor分期、国际预后指数(IPI)评分无关;XIST靶向负调控miR-140-3p的表达,miR-140-3p靶向负调控PD-L1的表达,XIST正向调控PD-L1的表达;与空白组、OE-NC组比较,OE-PD-L1组细胞中PD-L1蛋白、OD49 0nm值(24、48、72 h)、迁移细胞数目显著升高(P＜0.05);与OE-XIST组和OE-XIST+miR-NC组比较,OE-XIST+miR-140-3p mimics组中miR-140-3p表达水平显著升高,PD-L1蛋白表达水平、细胞增殖能力及迁移细胞数目显著降低(P＜0.05);与OE-XIST组和OE-XIST+si-NC组比较,OE-XIST+si-PD-L1组中miR-140-3p表达水平无显著变化,而PD-L1蛋白表达水平、细胞增殖能力及迁移细胞数目显著降低(P＜0.05).结论 LncRNA XIST通过靶向调控miR-140-3p/PD-L1轴促进DLBCL细胞增殖与迁移.