TAX1BP1调控B细胞自噬和凋亡的研究

目的 探究TAX1BP1在B细胞自噬与凋亡中的作用.方法 慢病毒感染B淋巴瘤细胞(Raji细胞),敲低TAX1BP1表达.利用雷帕霉素处理Raji细胞,通过Western blot、细胞免疫荧光染色和流式细胞术,观察自噬流强弱以及细胞凋亡情况.通过检测自噬相关通路P53蛋白表达变化,初步探索调控机制.结果 荧光显微镜观察慢病毒感染阳性率在90％以上.与阴性组比较,shTAX1BP1组细胞中TAX1BP1的mRNA表达水平降低80％、蛋白表达水平降低90％.经10nmol/L雷帕霉素处理后,与阴性组相比较,shTAX1BP1组LC3Ⅱ/Ⅱ比值显著下降(P＜0.01),凋亡相关蛋白Bcl-2表达显著升高,Bax、Caspase-3表达显著下降.敲低TAX1BP1降低Raji细胞自噬水平,减少Raji细胞凋亡.敲低TAX1BP1增加P53蛋白表达,推测TAX1BP1可能通过P53相关通路调控Raji细胞的自噬与凋亡.结论 敲低TAX1BP1可抑制Raji细胞自噬与凋亡,初步预测这一生物学作用可能与P53信号通路有关.本研究为进一步探讨SLE的发病机制奠定了一定的实验基础.