特异性敲低海马RNA甲基转移酶Pcif1对空间学习记忆的影响与机制研究

目的 探索RNA甲基转移酶Pcif1对海马相关空间学习记忆的影响及分子机制.方法 选择27只8周龄的雄性C57BL/6J Nifdc小鼠进行动物实验,随机分为3组(每组9只):Pcif1敲低组(对小鼠海马立体定位注射1μL的腺相关病毒包装的靶向Pcif1的shRNA)、假手术组(对小鼠海马立体定位注射1μL的对照腺相关病毒)、野生组(不做处理).3周后,Morris水迷宫实验用于测试小鼠的空间学习记忆能力,Western blot检测小鼠海马组织中相关蛋白的表达.选择小鼠海马神经元来源的HT22细胞系进行体外实验,细胞分为2组:HT22-shPcif1组(通过慢病毒包装的靶向Pcif1的shRNA实现细胞Pcif1的敲低)和HT22-Ctrl组(通过对照慢病毒感染细胞),通过全转录组测序(RNA-seq)、细胞毒性实验(CCK-8)、细胞划痕和流式细胞术研究敲低Pcif1影响学习记忆的机制.结果 与野生组和假手术组相比,敲低组小鼠的空间学习记忆能力增强,小鼠海马中的抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调.与HT22-Ctrl组相比,HT22-shPcif1组差异表达的基因富集到凋亡、迁移和增殖通路,细胞迁移能力增强,在400μmol/L H2O2条件下细胞增殖能力提高,凋亡水平下降.结论 选择性敲低海马Pcif1可以促进小鼠的空间学习记忆,其机制可能与抗凋亡蛋白上调,促进细胞迁移和增殖有关.