趋化因子CCL26 C端截短肽的抗菌活性及抗生物被膜作用的研究

为探究趋化因子CCL26 C端截短肽(26C)的生物学活性,本研究利用倍比稀释法测定了不同浓度的26C对耐多粘菌素B(PxB)大肠杆菌K1的浓度-杀菌曲线;利用外膜通透性试验(NPN)测定26C对细菌外膜的破坏效果;利用ATP泄露试验测定26C对细菌内容物泄露的影响;利用透射电镜观察26C作用于细菌细胞膜后对菌体及内容物的影响;利用结晶紫染色法和激光共聚焦试验测定26C对铜绿假单胞菌生物被膜(BF)形成的影响;利用溶血活性试验检测26C对人红细胞的溶血活性,并利用MTT法测定其对人表皮角质形成细胞HaCaT的细胞毒性.结果显示,26C在不同浓度下对K1均有良好的杀菌活性,4μmol/L时可以完全杀灭细菌,使活菌数降低41og;26C(2 μmol/L)通过破坏细菌细胞膜完整性并导致细菌内容物泄露而杀死细菌;低浓度的26C(1 μmol/L)即可显著降低BF的形成;其在高达128 μmol/L的浓度下对HaCaT细胞仍无溶血活性,且在1 μmol/L～16 μmol/L浓度对HaCaT细胞无毒性,其在32 μmol/L～64 μmol/L时对HaCaT细胞的毒性较低.本研究首次证实了 CCL26 C端截短肽26C具有良好的抗菌活性和抗BF形成的能力,又无溶血活性和细胞毒性,为其作为新型药物的临床研究和应用提供数据参考.