miR-3607-3p介导PFN2表达抑制宫颈癌细胞的恶性生物学行为

目的 探讨miR-3607-3p对宫颈癌细胞的恶性表型的作用及相关作用机制.方法 OncoLnc生物信息学网站分析miR-3607-3p的表达与宫颈癌患者预后的关系.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人正常宫颈上皮细胞(H8)和宫颈癌细胞系(Hela、HCC94、SiHa、C33A)中miR-3607-3p的表达情况.SiHa细胞体外转染阴性对照核苷酸序列为阴性对照(NC)组,转染miR-3607-3p模拟序列为miR-3607-3p组.qRT-PCR检测转染后的SiHa细胞中miR-3607-3p表达变化.采用CCK-8法和划痕实验检测转染前后SiHa细胞的恶性生物学行为变化.qRT-PCR和Western blot检测转染前后肌动蛋白结合蛋白2(PFN2)基因表达变化,双荧光素酶报告基因实验检测miR-3607-3p与PFN2的靶向关系.结果 miR-3607-3p表达水平高的宫颈癌患者生存期显著长于miR-3607-3p低表达患者(P＜0.01).与H8细胞相比,miR-3607-3p在人宫颈癌细胞系中异常低表达(P＜0.05),其中SiHa细胞系中表达最低(P＜0.01).NC组和miR-3607-3p组miR-3607-3p表达分别为(1.04±0.31)和(9.28±1.76),转染miR-3607-3p模拟序列后SiHa细胞miR-3607-3p表达水平明显高于NC组(P＜0.01),增殖活性和划痕愈合率明显低于NC组(均P＜0.01).双荧光素酶报告基因实验证实miR-3607-3p直接靶向结合 PFN2(P＜0.01).qRT-PCR 和 Western blot 结果显示,miR-3607-3p 组的PFN2 mRNA和蛋白表达均低于NC组,增殖蛋白CDK3、CDK2表达低于NC组,上皮表型相关蛋白Claudin-1、ZO-1表达高于NC组(均P＜0.01).结论 miR-3607-3p与宫颈癌患者的生存期相关,上调miR-3607-3p表达可抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖和迁移,其机制可能与靶向抑制PFN2有关.