牛瘤胃微生物的分离鉴定与生化特性分析

[目的]通过对瘤胃液中分离所得的菌株进行研究,为益生菌制剂的制备提供基础数据.[方法]采集10头健康荷斯坦奶牛的瘤胃液,通过涂布、特性培养、纯化等步骤获得单一菌株,提取细菌DNA,进行16S rDNA的PCR扩增.通过16S rDNA基因测序鉴定后进行序列比对并构建系统发育树,确定菌株种类.对不同种类的细菌进行0～48 h的培养测定其生长特性,并进行耐酸碱和耐胆盐试验.[结果]通过涂布分离菌株得到20株分离菌,经PCR扩增后测序发现20株菌属于7种不同的菌,大致确定L7为解淀粉芽孢杆菌、K7为枯草芽孢杆菌、S7为嗜麦芽窄食单胞菌、C2为地衣芽孢杆菌、M7为马链球菌、F7为弗氏酸柠檬杆菌、T7为吉氏库特菌.通过生长曲线可以看出,7株菌分别在24～36 h达到最快生长期.M7和K7对酸有较强的耐受性,而S7、C2和F7对酸性较为敏感,C2对碱的耐受性最强,而T7对胆盐的耐受性最强,S7对胆盐最不耐受.[结论]本研究从瘤胃中分离得到的7个菌株对酸碱和胆盐具有不同程度的耐受性,以及最适生长周期.