自噬介导NLRP3活化对小鼠肺纤维化的影响

目的 探讨肺纤维化小鼠自噬活性改变对NLRP3炎性体活化的影响.方法 将32只雄性SFP级C57BL/6小鼠随机分为对照组(A组)、实验组(B组、C组、D组),每组各8只小鼠.实验组B组、C组、D组雾化吸入剂量为35 mg/kg博来霉素(BLM),并分别在给药后第7天、第14天、第28天处死,A组雾化吸入相同容积生理盐水,并在给药后第28天处死.HE染色观察小鼠肺组织病理改变;Masson染色计算肺组织胶原纤维沉积;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织p62、Beclin1、NLRP3、Caspase-1、Notch1的表达水平.结果 HE染色结果显示,A组小鼠肺组织肺泡结构基本正常,未见明显纤维化;B组、C组、D组小鼠肺组织纤维化程度逐渐加重,可见纤维化病灶逐渐扩大,肺间质纤维组织增生.Masson染色显示,肺间质有少许蓝色染色区域.B组、C组、D组,蓝色染色区域依次增加,肺间质蓝色染色区域面积差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot结果显示,A组p62相对表达量低于各实验组,实验组B、C、D组之间差异有统计学意义(P＜0.05);A组Beclin1表达量高于各实验组,实验组B、C、D组之间差异有统计学意义(P＜0.05);A组NLRP3、Caspase-1、Notch1表达量均低于实验组,差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组B、C、D组中NLRP3、Caspase-1、Notch1之间的表达量差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 自噬抑制和NLRP3炎性小体激活在小鼠肺纤维化中扮演重要角色;自噬活性降低,Notch1信号通路活化后导致NLRP3炎性小体激活,其可能是小鼠肺纤维化逐渐加重的机制之一.