生孢噬纤维菌纤维素酶关键氨基酸饱和突变及性质

Journal of Dalian Dalian Polytechnic University(2022)

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摘要
Sm_2974是来源于生孢噬纤维菌(Sporocytophaga myxococcoides)的一个双功能纤维素酶,具有较高的催化效率.以Sm_2974为模板,将第205位色氨酸残基进行饱和突变后,所有突变体的CMC酶活和pNPC酶活均有不同程度的降低,而色氨酸向酪氨酸的突变使Sm_2974的pNPC酶活完全丧失.突变为天冬氨酸使Sm_2974对滤纸纤维素的水解能力增加,而突变为苏氨酸和谷氨酰胺则使Sm_2974与滤纸底物的结合能力降低,进而影响了酶催化效率.结果表明,第205位色氨酸残基对Sm_2974的底物结合能力及纤维素水解能力均有重要影响,可能是酶活性中心的关键氨基酸残基.
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