人脐带间充质干细胞及其外泌因子对白消安致雄性小鼠生殖损伤的保护作用

目的 探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs)及其外泌因子对白消安(busulfan,BSF)致雄性小鼠生殖损伤的保护作用.方法 将HUMSCs无血清培养48 h获得条件培养基(condi-tioned medium,CM),超滤浓缩为原培养基25倍.将BSF(40 mg/kg)通过腹腔注射小鼠,处理后第2天,将浓缩后的条件培养基注射至小鼠尾静脉,同时设对照组(生理盐水)、BSF组和HUMSCs组,治疗频次为每周2次,连续4周.取小鼠一侧睾丸,苏木素-伊红染色观察切片组织生精小管基底膜细胞分离情况和基底腔空泡形成情况;实时荧光定量PCR(qPCR)检测小鼠生精细胞减数分裂相关基因mRNA的表达水平;Western blot分析小鼠睾丸组织中细胞黏附相关蛋白的表达水平.结果 与其他组相比,HUMSCs-CM组小鼠睾丸损伤延迟,包括生精上皮基底膜细胞形成空泡和基底膜细胞脱离;HUMSCs-CM组小鼠生精细胞减数分裂基因STRA8、TNP2、SCP3 mRNA表达水平显著增加(P＜0.05),小鼠睾丸组织中 N-钙黏蛋白(N-cadherin)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和P-钙黏蛋白(P-cadherin)表达水平显著增加(P＜0.05).结论 HUMSCs外泌因子通过减少生精细胞凋亡和增强细胞间的黏附作用保护BSF致精子发生的损害,上调黏附分子的表达.