柴胡皂苷A对溃疡性结肠炎大鼠IKK/IKB/NF-κB信号通路及肠上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨柴胡皂苷(SS)A对溃疡性结肠炎(UC)大鼠核因子(NF)-κB抑制物激酶(IKK)/抑制因子 κB(IKB)/NF-κB信号通路及肠上皮细胞凋亡的影响.方法 制备UC大鼠模型,造模后随机分为模型组、SSA(低、中、高)剂量组、阳性对照组,每组10只;正常组10只大鼠作为空白对照.常规饲养2 d,第3天时SSA(低、中、高)剂量组分别灌胃(12.5、25.0、50.0)mg/kg SSA,阳性对照组灌胃0.5 g/kg柳氮磺吡啶(SASP),正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续5 d.苏木素-伊红(HE)染色观察肠黏膜组织形态;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;TUNEL染色观察肠上皮细胞凋亡情况;Western印迹检测肠黏膜组织中IKKα、IKB、NF-κB p65、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平.结果 正常组大鼠实验结束后毛色有光泽,大便正常;肠黏膜组织完整,肌层结构正常.模型组大鼠毛色暗淡无光泽,大便出现不同程度的便血现象,便稀且黏;肠黏膜处出现明显炎症现象,细胞排列紊乱,部分结肠腺体被浸润的炎症细胞替代,黏膜层变薄.SSA(低、中、高)剂量组、阳性对照组大鼠毛色较暗淡,大便出现不同程度的缓和;出现不同程度的炎症浸润和肠腺溃疡现象,但较模型组有所降低.与正常组相比,模型组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,肠上皮细胞凋亡率,肠黏膜组织中IKKα、IKB、NF-κB p65、caspase-3、Bax蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白水平显著降低(均P<0.05);与模型组相比,SSA(低、中、高)剂量组、阳性对照组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,肠上皮细胞凋亡率,肠黏膜组织中IKKα、IKB、NF-κB p65、caspase-3、Bax蛋白水平显著降低,Bcl-2蛋白水平显著升高(均P<0.05);随着SSA给药剂量的增加,SSA各剂量组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,肠上皮细胞凋亡率,肠黏膜组织中IKKα、IKB、NF-κB p65、caspase-3、Bax蛋白水平逐渐降低,Bcl-2蛋白水平逐渐升高(均P<0.05),呈剂量依赖性.结论 SSA可抑制IKK/IKB/NF-κB信号通路及肠上皮细胞凋亡,实现对UC大鼠的保护.