牛源嗜麦芽寡养单胞菌的分离鉴定、毒力、耐药基因及生物学特性分析

旨在明确荷斯坦奶牛瘤胃内嗜麦芽寡养单胞菌的生物学特性、耐药性以及携带的毒力和耐药基因等信息.采集荷斯坦奶牛瘤胃内容物,经富集、分离和纯化等步骤获得菌株,通过16S rDNA测序以及同源性分析确定菌株种 属,纸片扩散法检测菌株耐药性,PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测菌株携带的毒力和耐药基因,通过小鼠灌喂试验检测菌株的致病性.最后从荷斯坦奶牛瘤胃内共分离到17株嗜麦芽寡养单胞菌PMIK-2(Stenotrophomonas malto-philia),其中高产奶牛组4株、低产奶牛组13株.生物学特性结果表明,分离菌株的最佳生长温度为38℃,最适生长pH为7.0,对胆盐有较强的耐受性.药敏结果显示,分离菌株对卡那霉素、头孢氨苄、头孢唑啉、克拉霉素、红霉素、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星高度敏感,对链霉素、氨苄西林、四环素、亚胺培南、庆大霉素具有耐药性.此外,在分离株的基因中检测到了 fimH、mrkD和wabG 3种毒力基因和AadA 1、BlaSHV1、TetD 3种耐药基因.菌株致病性结果显示,灌喂PMIK-2菌液1.0×107,1.0×109,1.0×1011 CFU/mL 3个浓度的致死率分别为28.6％～42.9％,42.9％～57.1％和71.4％～85.7％.嗜麦芽寡养单胞菌PMIK-2的生化特性基本符合伯杰氏系统细菌学手册,最适生长温度和pH值以及对胆盐的耐受能力也说明其可以在奶牛肠道中生存.在治疗感染PMIK-2引起的疾病时,应当减少或者避免使用链霉素、氨苄西林、四环素、亚胺培南、庆大霉素等药物.PMIK-2具有较强的致病性,高产组与低产组奶牛瘤胃内分离PMIK-2菌株数量的不同可能是其生产状况产生差异的原因之一.