犬流感病毒诱导的Beagle犬NLRP3炎性小体相关基因表达谱

炎症反应是机体对抗异物的一种先天性免疫反应,NLRP3(nod-like receptor family,pyrin domain-containing 3)炎症小体途径是炎症反应的主要途径之一,在机体对抗病原微生物反应中起着重要的作用.为了深入研究犬的NL-RP3炎症小体在犬感染H3N2犬流感病毒(CIV)后的变化,对未感染以及感染H3N2 CIV早期(3 d)和后期(7 d)的比格犬心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑、气管和淋巴结组织进行病理学检测.结果发现,感染H3N2 CIV的比格犬,在早期没有明显的病理变化,炎症反应不明显,但后期炎症反应明显增强.通过荧光定量PCR检测比格犬感染H3N2 CIV后NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-6、IL-1β、IL-18和TNF-a等炎症相关基因的转录水平,发现宿主在感染CIV早期炎症相关基因转录水平显著降低,而在感染H3N2 CIV后期的炎症相关基因转录水平比早期显著升高.进一步克隆犬NLRP3、ASC和Caspase-1基因并进行原核表达,制备多克隆抗体,通过免疫组织化学方法对未感染以及感染 H3N2 CIV 早期和后期的比格犬组织中的 NLRP3、ASC(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD)和Caspase-1蛋白的表达水平进行检测.结果发现在感染H3N2 CIV早期的犬组织中NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白的阳性反应与对照组相比总体上没有明显的变化,而在感染后期犬组织中NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白阳性反应明显增强.本研究为进一步研究流感病毒与宿主炎症反应的关系提供了思路,为后期更好地预防和治疗犬流感提供了理论依据.