肝复乐调控PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导肝癌细胞凋亡的作用机制

目的:探讨肝复乐通过PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制人肝癌HepG2细胞增殖的作用机制.方法:以不同质量浓度(0.1、0.5、1mg/mL)的肝复乐、阳性对照药(顺铂,3.58×10-6mg/mL)处理HepG2人肝癌细胞细胞和L02人正常肝细胞,采用CCK-8法检测细胞活性;细胞划痕实验检测药物干预后细胞迁移能力的变化;流式细胞术检测药物干预后细胞凋亡情况;qPCR法检测PI3K、AKT、mTOR mRNA的表达情况;Western Blot法检测PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平.结果:CCK-8法检测结果显示,肝复乐可有效抑制HepG2细胞活性(P＜0.05,P＜O.01),呈浓度和时间依赖性,且对L02人正常肝细胞在最大给药浓度内无明显抑制作用.细胞迁移实验提示,与空白对照组比较,肝复乐中、高剂量干预组可显著抑制HepG2细胞的迁移能力(P＜0.05).流式细胞术实验提示,肝复乐组能有效诱导HepG2细胞凋亡(P＜0.05,P＜0.01).qRT-PCR和Western Blot检测结果显示,与空白对照组比较,药物处理24h后,肝复乐中、高剂量组PI3K、AKT、mTOR mRNA及蛋白表达显著下调(P＜0.05,P＜0.01).结论:肝复乐可通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白PI3K、AKT、mTOR、p-AKT、p-mTOR的表达降低细胞迁移能力,诱导细胞凋亡,抑制HepG2细胞增殖.