Protective Effect and Mechanism of Xinyang Tablet(心阳片)-containing Serum Regulating MLK3-mediated Ferroptosis on Cardiomyocytes

目的 探讨心阳片含药血清调控MLK3介导的铁死亡对心肌细胞的保护作用及机制.方法 20只SD大鼠随机分为对照组和含药血清组,含药血清组按照人与动物体表面积等效剂量换算,给予心 阳片0.24 g/kg进行灌胃,每日2次,对照组给予等量生理盐水灌胃,连续灌胃7 d后制备血清.将心肌细胞HL-1分为空白组(Control)、FIN56组、FIN56+URMC-099组(FIN56+U-099)、FIN56+心阳片含药血清组(FIN56+XYP).收集上述各组细胞,ROS荧光染色检测HL-1细胞活性氧水平,测定HL-1细胞MDA、T-SOD和GSH表达水平,RT-PCR检测各组细胞ANP和BNP mRNA水平,Western Blot法检测各组细胞MLK3、p53、GPX4和FTH1蛋白表达水平.结果 与空白组相比,FIN56组细胞ROS、MDA表达水平显著升高(P＜0.01),T-SOD和GSH表达水平降低(P＜0.01).ANP和BNP mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),MLK3和p53蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),GPX4和FTH1蛋白表达水平显著降低(P＜0.01);与FIN56组比较,给予URMC-099和心阳片含药血清能降低ROS、MDA表达水平(P＜0.01),升高T-SOD和GSH表达水平(P＜0.01).显著抑制ANP和BNP mRNA的表达(P＜0.01)以及MLK3和p53蛋白表达(P＜0.01),激活GPX4和FTH1蛋白表达(P＜0.01).结论 心阳片含药血清可能通过调控MLK3,抑制心肌细胞铁死亡改善心肌损伤.