丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡及分裂的影响

目的:探讨丙型肝炎病毒（HCV）NS3/4A蛋白对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡及分裂的影响。方法:采用同源重组方法构建重组质粒pLV-Green-NS3/4A和pLV-puro-NS3/4A，将细胞分为pLV-Green-NS3/4A或pLV-puro-NS3/4A转染组及其相应对照组（转染空载体）。采用免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测重组蛋白表达情况，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖能力，DAPI染色法检测细胞凋亡情况，免疫荧光分析细胞有丝分裂情况。结果:pLV-Green-NS3/4A转染组SMMC-7721细胞的生长状态差于相应空载体对照组；与相应空载体对照组比较，第3、4天pLV-Green-NS3/4A转染组SMMC-7721细胞增殖活性均被抑制（均 P<0.05）。pLV-Green-NS3/4A转染组和相应空载体对照组细胞凋亡率分别为（20.3±3.5）%和（5.3±1.5）%，差异有统计学意义（ t=-8.57， P<0.001）。与相应的空载体对照组比较，pLV-puro-NS3/4A转染组细胞出现更多的多极纺锤体，两组多极分裂率分别为（2.33±0.58）%、（6.01±0.99）%，差异有统计学意义（ t=-5.50， P=0.005）。 结论:HCV NS3/4A可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖、促进细胞凋亡和多极分裂。