丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡及分裂的影响
Cancer Research and Clinic(2022)
Abstract
目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)NS3/4A蛋白对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡及分裂的影响。方法:采用同源重组方法构建重组质粒pLV-Green-NS3/4A和pLV-puro-NS3/4A,将细胞分为pLV-Green-NS3/4A或pLV-puro-NS3/4A转染组及其相应对照组(转染空载体)。采用免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测重组蛋白表达情况,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,DAPI染色法检测细胞凋亡情况,免疫荧光分析细胞有丝分裂情况。结果:pLV-Green-NS3/4A转染组SMMC-7721细胞的生长状态差于相应空载体对照组;与相应空载体对照组比较,第3、4天pLV-Green-NS3/4A转染组SMMC-7721细胞增殖活性均被抑制(均 P<0.05)。pLV-Green-NS3/4A转染组和相应空载体对照组细胞凋亡率分别为(20.3±3.5)%和(5.3±1.5)%,差异有统计学意义( t=-8.57, P<0.001)。与相应的空载体对照组比较,pLV-puro-NS3/4A转染组细胞出现更多的多极纺锤体,两组多极分裂率分别为(2.33±0.58)%、(6.01±0.99)%,差异有统计学意义( t=-5.50, P=0.005)。 结论:HCV NS3/4A可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖、促进细胞凋亡和多极分裂。
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Key words
Carcinoma, hepatocellular,Hepatitis C virus,Cell proliferation,Apoptosis,Cell division
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