同种属来源一抗在乳腺癌量子点多标记荧光染色中的应用

目的:利用多色量子点(QDs)对细胞角蛋白(CK)、雌激素受体(ER)和人类表皮生长因子受体2(HER-2)进行间接法荧光染色,探讨同种属来源一抗多标记QDs染色的可行性和应用效果.方法:利用EliVision二步法对28例浸润性乳腺癌组织中CK、HER-2和ER进行免疫组化染色,利用QDs-565、QDs-655和QDs-605对28例浸润性乳腺癌组织中CK、HER-2和ER进行间接法单标记荧光染色和三标记荧光染色,使用装备有CRi Nuance多光谱成像系统的Olympus BX51荧光显微镜采集荧光光谱信息,并从采集的荧光图像中选取单个乳腺癌细胞进行亚细胞定位分析.结果:对于单个靶标而言,免疫组化染色和QDs荧光染色都能较清楚地显示靶标的亚细胞定位和表达情况.三标记荧光染色结果显示,绿色QDs-565标记了主要表达于肿瘤细胞质的CK,呈现出癌巢的轮廓,红色QDs-655和品红色QDs-605分别标记了表达于肿瘤细胞膜的HER-2和细胞核的ER,两种同种属来源的一抗HER-2和ER未发生明显的交叉反应.对三种靶标的亚细胞定位分析显示,胞核中ER的品红色荧光信号与胞膜上HER-2的红色荧光信号和胞质中CK的绿色荧光信号在空间上分离清楚,未发生明显光谱重叠现象.结论:基于多色QDs的间接法多标记荧光染色,通过调整抗体浓度、优化孵育时间、彻底清洗等手段,可较好地避免一抗种属来源相同时的交叉反应,与CRi Nuance多光谱成像系统进行结合,有利于对各个靶标分子进行分离和亚细胞定位,实现更准确的光谱定量分析.