地佐辛对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及对Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨地佐辛对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及对Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法:使用质量浓度为0、5、10、20、40和80μg/mL的地佐辛处理MC3T3-E1细胞48 h后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率,计算半数抑制浓度(IC50).将MC3T3-E1细胞分为对照组、地佐辛低浓度组(10μg/mL)、地佐辛中浓度组(20μg/mL)、地佐辛高浓度组(40μg/mL)和地佐辛高浓度+氯化锂(LiCl)组(40μg/mL+20μmol/L),采用CCK-8检测细胞存活率;碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测细胞ALP活性;茜素红染色检测细胞钙化结节;蛋白质印迹法检测细胞中成骨分化相关蛋白[Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)和骨钙素(OCN)]及Wnt/β-catenin信号通路蛋白(Wnt3a、β-catenin)表达水平.结果:MC3T3-E1细胞对地佐辛的IC50约为20μg/mL;与对照组比较,地佐辛低、中及高浓度组细胞存活率、ALP活性和钙化结节数目,RUNX2、OPN、OCN、Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与地佐辛高浓度组比较,地佐辛高浓度+LiCl组细胞存活率、ALP活性和钙化结节数目,RUNX2、OPN、OCN、Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:地佐辛可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来抑制成骨细胞MC3T3-E1的增殖、分化.