Cardiobacterium valvarum临床分离株的生物学特性研究及16S rRNA鉴定

目的 采用不同的方法描述Cardiobacterium valvarum(C.valvarum)临床分离株的生物学特性,利用16S rRNA基因测序技术进行分子鉴定.方法 转种阳性血培养标本到血琼脂平板上进行细菌培育,革兰染色涂片镜检,用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定分析仪对临床分离株进行细菌鉴定,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对分离株的蛋白质进行高通量测定,E-test法对分离株作药敏试验.提取分离株的DNA,采用16S rRNA基因测序技术对PCR的产物进行测序,在NCBI的BLAST网站上与GenBank数据库上的序列做相似性比较,用MEGA7.0.26软件构建该分离株的系统进化树.结果 经细菌培养发现小而圆、光滑、不透明,灰色的菌落;经革兰染色后镜下见到小、两端圆形、革兰阴性的多形性杆菌;VITEK 2 Compact上机、MALDI-TOF-MS技术均未得到该分离株的鉴定结果;16S rRNA基因测序技术测得该菌株基因全序列约为1 450 bp,与C.valvarum F0432的16S rRNA同源性为99.59％,鉴定为C.valvarum.结论 该菌的形态、生化反应均无代表性,采用16S rRNA基因测序技术可以对C.valvarum进行鉴定,对该疾病的诊断具有重要意义.