烟草附球菌叶斑病的病原及生物学特性

[目的]明确贵州省烟草附球菌叶斑病病原菌种类及生物学特性,为烟草附球菌叶斑病的防控提供理论依据.[方法]以采集自贵州省烟区的烟草附球菌叶斑病叶为材料,使用常规组织分离法和离体叶片接种法分别对其病原菌进行分离和Koch's法则验证,使用形态学特征结合核糖体内转录间隔区(ITS)、28S rRNA(LSU)、β-微管蛋白(tub2)和RNA聚合酶II第二大亚基(rpb2)部分序列的多核苷酸序列系统学分析方法对病原菌进行鉴定,并使用菌落生长法研究病原菌生物学特性.[结果]从烟草附球菌叶斑病叶片病斑上分离获得病原菌(标记为YC1105),经ITS、LSU、tub2和rpb24个核苷酸片段序列和系统发育分析,菌株YC1105与Epicoccum latusicollum聚为一支,且支持率为100％;在PDA培养基上菌丝为红色,分生孢子椭圆形,单胞,大小为4.35～6.44μm×2.10～3.27μm,分生孢子器椭圆形,无刚毛,NaOH颜色反应呈阳性,其特征与Epicoccum latusicollum相符,结合形态特征和分子生物学方法将病原菌鉴定为E.latusicollum.病原菌生物学特性测定结果表明,菌株YC1105菌丝生长最适培养基为胡萝卜琼脂培养基,在5和10℃生长缓慢,最适温度为28℃,最适碳源为麦芽糖,最适氮源为牛肉浸粉,尿素不利于菌丝生长;病原菌在pH 4～10范围内均能生长,最适pH为6,光照对菌丝生长影响不显著(P>0.05);菌丝致死温度为49℃,水浴10 min.[结论]明确引起贵州烟草附球菌叶斑病的病原菌为Epicoccum latusicollum,该病原菌适宜在弱酸性条件下生长,菌丝生长温度范围较宽.