大豆多基因编辑表达载体的构建及应用

大豆基因家族往往存在多个功能相似的基因,开发多基因编辑载体对多基因或基因家族进行编辑,对遗传转化效率低的大豆的基因编辑及基因功能研究具有重要的应用价值.本研究利用大豆特有的不同U6启动子驱动表达sgRNA,利用载体上同尾酶将不同大豆U6启动子表达的sgRNA进行串联,成功构建了可以同时对大豆多个基因进行编辑的CRISPR/Cas9多基因编辑表达载体pCambia3301-Cas9-GmU6n-gDNAn.并利用该载体,在大豆发状根中成功实现了大豆GRF(Growth-Regulating Factor)基因家族不同成员同时被编辑的目的.该载体的创建有效提高了大豆基因编辑效率,为大豆基因编辑及基因功能研究提供重要的工具.