以金黄色葡萄球菌重组IsdB137-361为抗原的牛血清抗体间接ELISA检测方法建立
Journal of Heilongjiang August First Land Reclamation University（2022）
摘要
奶牛乳房炎是危害奶牛健康和影响奶业发展的重要而常见奶牛疾病,金黄色葡萄球菌(S.aureus)是引起奶牛乳房炎的重要病原菌,已经用S.aureus铁调节的表面决定簇B(IsdB)的免疫优势片段IsdB137-361与其他抗原成分构建了预防S.aureus感染的奶牛乳房炎候选疫苗(命名为GIT).为了检测该候选疫苗免疫奶牛后的IsdB137-361相关抗原的血清抗体,用pGEX-6p-1表达的IsdB137-361作抗原建立了牛血清抗体间接ELISA检测方法.通过对抗原包被浓度、血清稀释倍数和反应条件进行了优化,确定cut-off值检测了血清交叉反应性和敏感性.结果显示,在抗原使用浓度为2.5μg·mL-1、血清1:1000倍稀释、cut-off值为0.45时,该方法具有良好的特异性和敏感性.表明,所建立的间接ELISA检测方法可用于IsdB137-361相关抗原疫苗的免疫牛血清抗体检测.
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