基于Keap1/ARE通路探究氧化苦参碱对肝癌大鼠肝损伤的改善作用

目的:分析氧化苦参碱(OMT)对肝癌大鼠肝损伤的改善作用,并探讨Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)/抗氧化反应元件(ARE)通路在该过程中发挥的作用.方法:大鼠随机分为空白组、模型组、OMT组、Brusatol组、OMT+Bru组.除空白组外所有大鼠腹腔注射二乙基亚硝胺50 mg/kg建立肝癌大鼠模型.各组用不同方法干预20 d.干预结束,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、总胆汁酸(TBA)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察肝组织病理学变化;TUNEL染色检测大鼠肝癌细胞凋亡情况;Western Blot法检测肝组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、Keap1、ARE蛋白相对表达水平.结果:与模型组比较,OMT组、OMT+Bru组大鼠ALT、AST、TBil、TBA、IL-1β、TNF-α水平降低,Bru-satol组大鼠血清ALT、AST、TBil、TBA、IL-1β、TNF-α水平升高,且OMT组血清ALT、AST、TBil、TBA、IL-1β、TNF-α水平低于OMT+Bru组(P<0.05).HE染色结果显示:空白组肝细胞形态正常,排列整齐.模型组肝细胞排列紊乱,明显肿胀,大量炎细胞浸润.OMT组肝细胞损伤程度明显改善.Brusatol组肝细胞肿胀、坏死、排列紊乱,炎细胞浸润.OMT+Bru组肝细胞损伤有所改善.与模型组比较,OMT组、OMT+Bru组肝癌细胞凋亡率、Nrf2、ARE蛋白相对表达水平升高,Keap1蛋白相对表达水平降低,Brusatol组肝癌细胞凋亡率、Nrf2、ARE蛋白相对表达水平降低,Keap1蛋白相对表达水平升高(P<0.05);OMT组肝癌细胞凋亡率,Nrf2、ARE蛋白相对表达水平高于OMT+Bru组,Keap1蛋白相对表达水平低于OMT+Bru组(P<0.05).结论:OMT对大鼠肝癌具有抑制作用,能够改善肝损伤,可能是通过激活Keap1/ARE通路实现的.