PARP-1通过p16参与氢醌诱导TK6恶性转化细胞周期信号的调控

目的 探讨聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1(PARP-1)和p16/视网膜母细胞瘤(Rb)信号通路在氢醌(HQ)诱导的TK6细胞中的表达及其相关调控机制.方法 按照2×2析因设计模型,将TK6细胞按HQ染毒水平分为磷酸缓冲盐溶液(PBS)-TK6组和HQ-TK6组,再按照多柔比星(DOX)干预水平分为无DOX干预组和DOX干预组,共4组.PBS-TK6组细胞以PBS处理,HQ-TK6组细胞予终浓度为20.0 μmol/L的HQ染毒处理;无DOX干预组细胞加入体积分数为0.05％的二甲基亚砜,DOX干预组细胞加入终浓度为0.5 μmol/L的DOX.采用流式细胞术检测细胞周期分布情况,蛋白免疫印迹法检测p16/Rb信号通路p16、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、多功能蛋白E2转录因子1(E2F1)、Rb、p-Rb蛋白表达水平,免疫荧光和免疫共沉淀法检测p16核糖化水平.结果 主效应分析结果显示,与PBS-TK6组比较,HQ-TK6组细胞G0/G1期细胞周期分布百分比和p16蛋白相对表达水平均下调(P值均＜0.05),S期细胞周期分布百分比和cyclinD1、p-Rb蛋白相对表达水平均上升(P值均＜0.05);与无DOX干预组比较,DOX干预组细胞在GO/G1期、G2/M期的细胞周期分布百分比和p16蛋白相对表达水平均上升(P值均＜0.05),在S期细胞百分比和cyclinD1、p-Rb蛋白相对表达水平均下调(P值均＜0.05).交互效应分析结果显示,与PBS-TK6细胞无DOX干预组比较,PBS-TK6细胞DOX干预组中Rb和E2F1蛋白相对表达水平均下调(P值均＜0.05),HQ-TK6细胞无DOX干预亚组的Rb蛋白相对表达水平均下调(P＜0.05),E2F1蛋白相对表达水平上调(P＜0.05);与PBS-TK6细胞DOX干预组比较,HQ-TK6细胞DOX干预组的Rb蛋白相对表达水平下调(P＜0.05),E2F1蛋白相对表达水平上调(P＜0.05);与HQ-TK6细胞无DOX干预组比较,HQ-TK6细胞DOX干预组的Rb蛋白相对表达水平上调(P＜0.05),E2F1蛋白相对表达水平下调(P＜0.05).结论 PARP-1可能通过调控p16/Rb信号通路参与TK6细胞的周期调控.