云南省大理市黄胸鼠恙虫病东方体的分离、鉴定及56 kDa型特异性抗原基因特征的研究

目的 从云南省大理市啮齿动物中分离和鉴定恙虫病东方体(Orientia tsutsugamsushi,Ot),并对分离到的Ot 56 kDa型特异性抗原(56 kDa TSA)基因全长进行扩增分析.方法 2020年8月-2021年8月采用夹夜法,在大理市4个乡(镇)采集啮齿动物样本,巢氏PCR扩增Ot保守基因,阳性样品采用小鼠腹腔接种法分离Ot.分离到的Ot用吉姆萨染色观察和间接免疫荧光试验进行鉴定,设计引物扩增Ot的56 kDa TSA全长,用MEGA X、DNAStar 7.1、SeqMan等生物信息学软件进行同源性与遗传进化分析.结果 共捕获啮齿动物5属6种76只,从1只黄胸鼠肝、脾组织研磨液中扩增出了 Ot序列,阳性率为2.38％(1/42).分离和鉴定了 1株Ot,命名为DALIV8.该分离株56kDa TSA基因全长1 566 bp,编码521个氨基酸(GenBank:OM914742).DALIV8株56 kDa TSA基因在核苷酸水平与Kawasaki、Boryong、Karp、Kato、TA763基因型相似性为82.30％～98.85％,在氨基酸水平相似性为74.04％～98.28％.该Ot分离株为TA763基因型.结论 云南省大理市黄胸鼠Ot分离株DALIV8,经对其56kDaTSA基因的分子鉴定,确定为云南省首次分离获得OtTA763基因型.