黄芪甲苷调控铁死亡途径改善高糖腹透液诱导的人腹膜间皮细胞损伤

目的 关于黄芪甲苷(AS-IV)能否调控PMCs铁死亡的研究报道少见.文章探究AS-IV对高糖腹透液(PDS)诱导人腹膜间皮细胞(HMrSV5)铁死亡的干预作用及可能机制.方法 ①采用4.25％PDS构建PD小鼠模型,予以不同剂量的AS-IV干预(0.5与1 mg/kg),分组为对照组,PD模型组,低、高剂量干预组.免疫荧光检测腹膜组织GPX4的表达.②体外培养HMrSV5细胞,CCK-8检测PDS及AS-IV对HMrSV5细胞活性的影响,根据检测结果确定后续实验的PDS浓度及AS-IV剂量范围.③采用3％PDS构建HMrSV5细胞损伤模型,予以不同剂量AS-IV干预(50、100及200μmol/L),分组为:空白组,模型组,低、中、高剂量AS-IV干预组,FerroOrange荧光探针检测Fe2+水平;DCFH-DA荧光探针检测活性氧水平;相应的试剂盒检测GSH和MDA含量;Western blot和RT-PCR分别检测P53、SLC7A11、GPX4和ACSL4等铁死亡相关蛋白及mRNA的表达.结果 与对照组相比,高剂量AS-IV部分上调PD小鼠模型腹膜组织GPX4的表达;模型组GSH含量[(15.82±1.00)μmol/g]较空白组[(32.63±1.44)μmol/g]减少(P<0.01),MDA含量[(3.87±0.21)nmol/mg]较空白组[(1.48±0.09)nmol/mg]增加(P<0.01),Fe2+、活性氧、P53及ACSL4的表达较空白组上调(P<0.01),GPX4与SLC7A11的表达较空白组下调(P<0.01);与模型组相比,中、高剂量AS-IV干预组GSH含量[(25.23±2.02、30.03±1.21)μmol/g]增加(P<0.01),MDA含量[(2.92±0.25、1.89±0.15)nmol/mg]减少(P<0.01),Fe2+、活性氧、P53及ACSL4表达下调(P<0.01),GPX4和SLC7A11的表达上调(P<0.01),mRNA的水平与蛋白表达一致.结论 PDS诱导的HMrSV5细胞损伤模型中存在铁死亡,且AS-IV能通过抑制细胞铁死亡,发挥保护细胞的作用,其机制可能与AS-IV降低细胞内Fe2+含量、抑制活性氧生成、提高xCT与GPX4活性有关.