鸭疫里默氏杆菌贵州流行株蜂胶灭活疫苗制备

[目的]制备鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)贵州流行株蜂胶灭活疫苗.[方法]选取RA血清2型贵州流行株(RA-SS-8株)为基础菌株,依次利用分光光度法和平板计数法测定细菌生长曲线,再进行灭活条件筛选,以蜂胶为佐剂制备RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,并进行无菌检验、安全性检验及免疫鸭攻毒保护性试验.[结果]分光光度法测定RA-SS-8株菌液D600nm:值随培养时间变化显示,细菌在0～3 h时增殖缓慢,在3～10 h时增殖趋势明显加快,在10 h以后增殖逐渐趋于平缓,随着培养时间的延长,细菌最终进入衰亡期;平板计数法结果显示,RA-SS-8株A600 nm值为0.1～0.8时,该菌处于对数生长期,且D600 nm值与活菌数呈现良好的线性关系;RA-SS-8株最佳灭活条件为0.2％甲醛溶液、37℃灭活12 h;蜂胶灭活疫苗含菌量为3.8×109CFU/mL,蜂胶干物质含量为10 mg/mL;无菌检验巧克力琼脂培养基上未见菌落生长;安全性检验以2倍免疫剂量接种雏鸭在观察期内未表现出不良反应,大体病变观察未见明显病变;免疫鸭攻毒保护性试验显示,蜂胶灭活疫苗免疫组鸭对RA-SS-8株的攻击后保护率为70％,蜂胶灭活疫苗对试验鸭心脏、肝脏组织均具有良好的保护效果.[结论]本研究成功制备了 RA贵州流行株蜂胶灭活疫苗,为蜂胶灭活疫苗制备和动物免疫试验奠定基础.