补骨脂素对炎症微环境下大鼠下颌骨成骨细胞成骨分化的影响及机制

目的:探讨补骨脂素对炎症微环境下大鼠下颌骨成骨细胞成骨分化能力的影响及机制.方法:使用酶消化法从SD大鼠提取下颌骨成骨细胞并鉴定;将成骨细胞分成6组,分别使用浓度为0、1、10、100、200、500μmol/L补骨脂素进行处理,CCK-8法检测成骨细胞增殖能力的影响并筛选出合适的浓度范围进行后续实验.分别使用浓度为0、1μg/mL脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)进行处理,荧光定量PCR检测成骨细胞肿瘤坏死因子α(tumor nec-rosis factorα,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)mRNA表达量;LPS构建炎症微环境,分别使用浓度为0、1、10、100μmol/L补骨脂素进行处理,茜素红染色测定钙结节数量;荧光定量PCR检测成骨相关指标成骨特异性转录因子(Runt-related transcription 2,Runx2)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)mRNA表达量;免疫印迹检测Runx2、ALP蛋白表达量.结果:可用酶消化法从SD大鼠提取下颌骨成骨细胞;补骨脂素浓度在1、10、100、200μmol/L不会明显影响成骨细胞增殖能力,差异无统计学意义(P>0.05),浓度在500μmol/L会明显抑制细胞增殖(P<0.05).LPS能上调TNF-α和IL-1βmRNA表达量(P<0.05);各浓度补骨脂素组钙结节数量均显著高于对照组,且呈浓度依赖性(P<0.05);各浓度补骨脂素组成骨相关指标Runx2、ALP的mRNA和蛋白表达量均显著高于对照组,且呈浓度依赖性(P<0.05).结论:补骨脂素可有效增强炎症微环境下大鼠下颌骨成骨细胞的成骨分化能力,其可能是通过上调Runx2、ALP的表达而发挥作用.