观察在体联合灌注SCL和Cx43基因重组慢病毒对豚鼠糖尿病膀胱逼尿肌的影响

目的:探究干细胞白血病基因(Stem Cell Leukemia,SCL)重组慢病毒和缝隙连接蛋白基因[Gap Junction Protein Alpha 1,GJA1(又名Connexin43,Cx43)]重组慢病毒联合作用对豚鼠糖尿病膀胱(Diabetic Cystipathy,DCP)逼尿肌的影响.方法:40只健康豚鼠适应性喂养1周后,按照200mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ),定期每周监测随机血糖,正常饲养12周后,通过尿流动力学检查筛选出40只符合标准的豚鼠,将其随机分成4组:糖尿病组、SCL慢病毒组、Cx43慢病毒组、SCL+Cx43慢病毒组.糖尿病组经尿道向膀胱内灌注0.2mL不含基因的空慢病毒,SCL组、Cx43组使用同样方法分别灌注SCL慢病毒和Cx43慢病毒0.2mL,SCL+Cx43慢病毒组经尿道灌注SCL、Cx43慢病毒各0.2mL.转染14天后进行尿流动力学检查,检查后处死豚鼠,取出豚鼠膀胱,制作逼尿肌肌条,行逼尿肌肌条收缩实验.结果:SCL组和Cx43组与糖尿病组相比,在尿流动力学检查中逼尿肌压力无明显差异(P＞0.05),SCL+Cx43组较糖尿病组尿流动力学检查可见逼尿肌压力有明显改善(P＜0.05).在逼尿肌肌条实验中,糖尿病组较正常组逼尿肌收缩幅度及频率明显下降(P＜0.05),SCL组与糖尿病组相比逼尿肌收缩幅度及频率有所改善(P＜0.05),Cx43组与糖尿病组相比,收缩幅度及收缩频率未见改善(P＜0.05),SCL组和Cx43组之间比较无统计学差异(P＞0.05).SCL+Cx43组与糖尿病组相比,逼尿肌收缩幅度及频率有明显差异(P＜0.05),SCL+Cx43组与正常组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:经尿道联合灌注SCL+Cx43基因重组慢病毒可以成功在豚鼠DCP膀胱中转染成功,可提高糖尿病膀胱逼尿肌压力,离体试验证实联合灌注较单一灌注可提高逼尿肌收缩幅度及收缩频率,为临床治疗DCP提供新的思路.