circBMPR2竞争性结合miR-6814-5p抑制肺腺癌细胞的作用机制

目的 环状RNA(circRNA)参与肺腺癌的发生发展过程,然而作用机制有待进一步研究.文章旨在探究cir-cBMPR2对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响及调控机制. 方法 收集30对肺腺癌组织和癌旁组织,其中5对标本进行高通量测序,根据高通量测序结果选取显著差异性表达的circBMPR2.利用qRT-PCR检测25对肺腺癌组织及癌旁组织、肺腺癌细胞系(A549、H1975、PC9)和正常支气管黏膜上皮细胞(BEAS-2B)中circBMPR2的表达水平.过表达质粒转染PC9细胞;小干扰RNA转染A549细胞,共分为两组对照,分别是PC9细胞OE-circ及对照组circ-NC,A549细胞si-circ及对照组si-NC.利用平板克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力.用蛋白质印迹法检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的表达水平.通过双荧光素酶实验及qRT-PCR验证circBMPR2与miR-6814-5p的靶向关系.通过蛋白质印迹法验证ARID1A是miR-6814-5p靶基因. 结果 circBMPR2在肺腺癌组织(0.30±0.10)中的表达水平较癌旁组织(1.00±0.29)低(P<0.05).与正常支气管黏膜上皮细胞相比,3株肺腺癌细胞株中的circBMPR2相对表达水平均低(P<0.05).与circ-NC组相比,OE-circ组PC9细胞克隆形成率、细胞迁移率、侵袭细胞数下降且N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量低(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量高(P<0.05).与si-NC组相比,si-circ组A549细胞细胞克隆形成率、细胞迁移率、侵袭细胞数上升且N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量高(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量低(P<0.05).qRT-PCR实验表明,PC9细胞中OE-circ组miR-6814-5p相对表达水平(0.47±0.04)较circ-NC组(1.00±0.16)降低(P<0.05);A549细胞中si-circ组miR-6814-5p相对表达水平(2.51±0.60)较si-NC组(1.00±0.12)明显升高(P<0.05). 结论 circBMPR2通过竞争性结合miR-6814-5p促进ARID1A的表达,抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肺腺癌细胞的上皮间质转化,有望成为肺腺癌治疗的潜在治疗靶点.