基于以方测证的膝骨关节炎风寒湿痹证模型大鼠构建研究

目的 基于"以方测证"思维,模拟人膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)风寒湿痹证的发病机制,以期建立稳定的KOA病证结合动物模型.方法 将50只大鼠随机分为空白(A)组、单纯风寒湿刺激(B)组、单纯KOA造模(C)组、KOA造模+风寒湿刺激(D)组、乌头汤灌胃(E)组,共5组,每组10只.采用膝关节腔注射木瓜蛋白酶复合风寒湿外环境造模,基于"以方测证"思维运用乌头汤进行验证,灌胃结束后观察大鼠一般情况、膝关节软骨HE染色及Mankin评分、膝关节Micro-CT检测、血清肿瘤坏死因子-α(tu-mour necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)浓度.结果 Mankin评分显示,A、B组得分为0～1分,属于正常软骨;C、E组为4～7分,属KOA早中期;D组为7～11分,属于KOA中晚期.C、D、E组Mankin评分及TNF-α、IL-1β、IL-17A浓度较A组及B组均明显升高(P<0.05),C、E组Mankin评分及TNF-α、IL-1β、IL-17A浓度较D组均明显降低(P<0.05),B组TNF-α、IL-1β、IL-17A浓度较A组明显升高(P<0.05).结论 与单纯KOA模型比较,采用膝关节腔注射木瓜蛋白酶复合风寒湿外环境刺激,KOA病情的进展更快,程度更严重,模型大鼠出现类似人体KOA风寒湿痹证的表现,并且乌头汤能够减轻复合模型风寒湿干预因素的影响,缓解疾病的进程.