TRPM2对小鼠脑缺血再灌注损伤中星形胶质细胞活化的影响

目的 探究瞬时受体电位M2(transient receptor potential melastatin 2,TRPM2)在小鼠脑缺血再灌注(is-chemia-reperfusion,I/R)过程中对星形胶质细胞活化的影响.方法 在体实验:设置野生假手术(WT-sham)组、TRPM2敲除假手术(TRPM2-/--sham)组、野生脑缺血再灌注(WT-I/R)组、TRPM2敲除脑缺血再灌注(TRPM2-/--I/R)组,采用"线栓法"建立小鼠大脑中动脉I/R模型,采用Bederson评分方法评价小鼠神经功能缺损情况;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色评价小鼠脑梗死体积;免疫荧光染色观察小鼠缺血侧海马区及皮层缺血半暗带区星形胶质细胞的活化情况.离体实验:纯化培养原代星形胶质细胞并建立氧糖剥夺再灌注(oxygen and glucose deprivation-reperfusion,OGD/R)模型,Western blot检测各组细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达情况.结果 在体实验中,与WT-sham组相比,WT-I/R组小鼠Bederson评分较高(P<0.05),脑梗死体积较大(P<0.05),缺血侧海马CA1、CA3、DG区及皮层缺血半暗带区GFAP荧光强度及阳性细胞数量增多(P<0.05);与WT-I/R组相比,TRPM2-/--I/R组小鼠Bederson评分降低(P<0.05),脑梗死体积减小(P<0.05),缺血侧GFAP荧光强度及阳性细胞数量显著减少(P<0.05).离体实验中,与WT-CTRL(control,CTRL)组相比,WT-OGD/R组细胞GFAP蛋白表达量增高(P<0.05);与WT-OGD/R组相比,TRPM2-/--OGD/R组GFAP蛋白表达量降低(P<0.05).结论 TRPM2敲除可抑制星形胶质细胞活化从而降低脑I/R损伤.