杨树桑黄查尔酮异构酶基因克隆鉴定与表达分析

对杨树桑黄(Sanghuangporus vaninii)查尔酮异构酶基因(SvCHI)进行克隆和生物信息学分析,利用荧光定量PCR方法研究SvCHI在菌丝体、一年生和三年生子实体中的表达情况,并测定查尔酮异构酶(SvCHI)活性.结果表明:SvCHI含有873 bp开放阅读框,编码290个氨基酸;SvCHI相对分子质量为32170,理论等电点(pI)为10.22,不稳定系数为49.47,总平均亲水性GRAVY值为-0.172;SvCHI为非跨膜蛋白,定位于线粒体,无信号肽,含有1个保守的CHI-3结构域(25～278 aa);SvCHI二级结构中无规卷曲、α螺旋、延伸链占比分别为50.69％、32.41％、16.90％;SvCHI氨基酸序列与暴马桑黄(S.baumii)和红皮孔菌(Pyrrhoderma noxium)查尔酮异构酶的相似性较高;菌丝体中SvCHI表达量显著低于一年生和三年生桑黄子实体,菌丝体中SvCHI活性显著高于一年生和三年生桑黄子实体.研究结果为进一步探讨杨树桑黄中黄酮类化合物的生物合成提供参考.