宫颈癌组织中miR-199b/紧密连接蛋白的表达及其对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响机制研究

目的 探讨miR-199b/紧密连接蛋白(CLDN6)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响机制.方法 收集2020年5月至12月湘南学院附属医院收治的30例宫颈癌患者的癌组织及癌旁组织标本,并培养宫颈癌SiHa细胞.将宫颈癌SiHa细胞进行转染,分为miR-con组(转染miR-con)、miR-199b组(转染miR-199b mimics)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-CLDN6组(转染pcDNA-CLDN6)、anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、anti-miR-199b组(转染anti-miR-199b)、anti-miR-199b+si-con组(共转染anti-miR-199b和si-con)、anti-miR-199b+si-CLDN6组(共转染anti-miR-199b和si-CLDN6)和NC组(正常培养).采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测组织和细胞中miR-199b和CLDN6 mRNA的表达水平,采用Western blot检测CLDN6蛋白表达,采用CCK-8法检测SiHa细胞的增殖,采用流式细胞术检测SiHa细胞的凋亡,采用双荧光素酶报告基因检测试验检测miR-199b和CLDN6的靶向关系.结果 宫颈癌组织中miR-199b的表达水平升高,CLDN6 mRNA的表达水平降低(P<0.05);miR-199b可靶向调控CLDN6的表达;抑制miR-199b的表达或促进CLDN6的过表达均可抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖,并促进其凋亡;抑制CLDN6表达逆转了抑制miR-199b表达对SiHa细胞增殖、凋亡的作用.结论 miR-199b可抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖,并促进其凋亡,其机制可能与上调CLDN6的表达有关.