电针预处理对大鼠离体心肌缺血再灌注心肌组织自噬的调控作用

目的 观察电针预处理心俞穴和神门穴对大鼠离体心肌缺血再灌注心肌组织自噬的调控作用.方法 将36只SD大鼠随机分为正常组、缺血再灌注组和电针预处理组,每组12只.电针预处理组在造模前3周给予电针心俞穴和神门穴干预,20 min/次,1次/d,6 d/周,连续干预3周后利用离体灌流装置制备大鼠离体心肌缺血再灌注模型(平衡灌注20 min,缺血40 min,再灌注2 h);缺血再灌注组不给予术前干预,模型制备方法同电针预处理组;正常组无缺血再灌注操作,平衡灌注180 min.停灌注前20 min取冠状动脉流出液,检测心肌酸激酶(CK)、心肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量;灌流结束后,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理形态,透射电镜观察大鼠心肌组织超微结构,Western blot法检测大鼠心肌组织中自噬标志蛋白Beclin-1和LC3-Ⅱ表达情况.结果 缺血再灌注组冠状动脉流出液中CK、CK-MB、LDH含量均显著高于正常组(P均<0.05),电针预处理组均显著低于缺血再灌注组(P均<0.05).HE染色显示缺血再灌注组心肌纤维溶解、断裂,甚至坏死,细胞肿胀;电针预处理组心肌纤维间隙轻度增宽,坏死灶少,细胞肿胀程度较轻.透射电镜显示缺血再灌注组心肌细胞线粒体嵴排列不规则、断裂,自噬溶酶体数量显著增加;电针预处理组心肌细胞核及线粒体结构基本完整,自噬溶酶体数量较缺血再灌注组少.缺血再灌注组心肌组织中Beclin-1和LC3-Ⅱ表达量均显著高于正常组(P均<0.05),电针预处理组均显著低于缺血再灌注组(P均<0.05).结论 电针预处理可通过下调自噬标志蛋白的表达,从而发挥保护心肌、减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用.