希佩尔-林道、缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子参与哮喘气道重塑

目的 探讨希佩尔-林道基因(VHL)、缺氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子(VEGF)是否参与哮喘发作时气道重塑.方法 人支气管上皮细胞分别进行4、8、16、24h低氧培养,利用蛋白质印迹法(Western blot)检测缺氧后VHL、HIF-1α及HIF-2α的表达,利用ELISA方法检测细胞培养基中VHL、HIF-1α、VEGF含量;建立动物模型,6～8周龄的BALB/c小鼠40只随机分成4组:正常对照组、屋尘螨(HDM)刺激哮喘模型组、缺氧组、HDM联合缺氧组(每组10只).4组小鼠均在暴露于常氧或缺氧7 d后分别留取支气管肺泡灌洗液(BALF),用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测支气管BALF中VHL、HIF-1α、VEGF的含量.采用两样本t检验、单因素方差分析统计数据.结果 人支气管上皮细胞缺氧16 h后VHL蛋白表达量明显减少,HIF-1α在缺氧24 h后蛋白表达明显增高,HIF-2α表达无明显改变;ELISA法检测不同时间低氧组及对照组细胞培养基中的VHL、HIF-1α、VEGF蛋白含量,缺氧16h组VHL低于对照组[(5.40±0.76)pg/ml 比(12.46±1.51)pg/ml,t=38.623,P＜0.01];缺氧 16 h 组 HIF-1α 高于对照组[(13.98±0.75)pg/ml 比(12.18±1.69)pg/ml,t=14.257,P＜0.05],缺氧 16 h 组 VEGF 高于对照组[(27.70±2.43)pg/ml比(24.62±2.11)pg/ml,t=7.584,P＜0.01].动物实验组结果示,HDM联合缺氧组小鼠肺泡灌洗液中 VHL低于单纯缺氧组[(6.21±0.74)pg/ml 比(11.14±1.78)pg/ml,t=43.287,P＜0.01];HDM联合缺氧组小鼠中HIF-1 α高于单纯缺氧组[(37.43±1.02)pg/ml比(27.14±1.31)pg/ml,t=13.254,P＜0.01];HDM 联合缺氧组 VEGF 高于单纯缺氧组[(51.11±2.39)pg/ml 比(42.83±3.06)pg/ml,t=7.389,P＜0.01].结论 VHL、HIF-1α、VEGF 参与了哮喘发作时气道重塑.