Wnt通过非经典通路调控RUNX家族转录因子2促进软骨分化

目的 探索人软骨细胞Wnt通路如何调控RUNX家族转录因子2(RUNX2)基因的表达从而诱导细胞表型改变.方法 使用人膝关节软骨样本,按Outerbridge分级选取损伤轻微区、交界区和严重区软骨,检测Ⅱ型胶原、Ⅰ型胶原、RUNX2基因的表达.使用抑制剂Dickkopf-1、PD98059、干扰RNA沉默丝裂原活化蛋白1/3、Dishevelled(DVL)1/2/3,检测人软骨细胞Wnt-3a诱导Ⅱ型胶原、Ⅰ型胶原、RUNX2基因表达改变作用变化.采用单因素方差分析和独立样本t检验分析结果.结果 软骨破坏严重区域Ⅱ型胶原表达低于轻微区域(0.3±0.08,t=11.008,P＜0.05),Ⅰ 型胶原 RUNX2 表达高于轻微区域(3.51±0.17,3.53±0.10,t=19.845、31.180,P＜0.05).Wnt-3a处理后人软骨细胞Ⅱ型胶原表达低于对照组(0.51±0.04,t=11.529,P＜0.05),Ⅰ型胶原RUNX2 表达高于对照组(1.47±0.12,2.10±0.14,t=4.907、20.976,P＜0.05).PD98059 阻断了Wnt-3a诱导的Ⅱ型胶原、Ⅰ型胶原和RUNX2表达变化,而Dickkopf-1并没有阻断这一过程.DVL-2或MAPK1表达沉默后,Wnt-3a对RUNX2表达诱导作用失效.结论 Wnt-3a通过DVL-2/MAPK1非经典通路上调RUNX2的表达从而促进软骨终末分化.