大黄素通过抑制半乳糖凝集素-3诱导甲状腺癌细胞内质网应激

目的 观察大黄素抑制半乳糖凝集素-3(Gal-3)影响甲状腺癌细胞增殖及内质网应激(ERS)相关蛋白的变化.方法 应用免疫组织化学与免疫印迹检测乳头状甲状腺癌(PTC)及其癌旁组织中Gal-3、增殖细胞核抗原(PCNA)表达量的差异;应用小干扰核糖核酸(siRNA)Gal-3干扰乳头状甲状腺癌细胞系(TPC-1)24 h后,观察细胞增殖能力及Gal-3、PCNA、ERS相关蛋白的变化;同时应用低(20 μmol/L)、中(40 μmol/L)、高(60 μmol/L)浓度大黄素处理TPC-1细胞24 h后检测细胞增殖能力及Gal-3、PCNA、ERS相关蛋白的变化.组间比较采用t检验.结果 PTC组织中的Gal-3、PCNA 高于癌旁组织[Gal-3:(0.728±0.288)U/L 比(0.197±0.158)U/L,t=2.805,P＜0.05;PCNA:(0.854±0.127)U/L 比(0.235±0.147)U/L,t=5.532,P＜0.01];应用 Gal-3 siRNA 干扰TPC-1细胞24 h后,干扰组中的Gal-3及PCNA表达水平均低于非特异性对照组[Gal-3:(0.265±0.229)U/L 比(1.315±0.268)U/L,t=5.153,P＜0.01;PCNA:(0.318±0.095)U/L 比(1.069±0.357)U/L,t=3.519,P＜0.05],同时诱导ERS相关的葡萄糖调节蛋白78(Grp-78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和CCAAT/增强子结合蛋白(CHOP)增加[Grp-78:(1.210±0.110)U/L比(0.857±0.081)U/L,t=4.464,P＜0.05;PERK:(0.957±0.114)U/L 比(0.634±0.083)U/L,t=3.964,P＜0.05;CHOP:(1.151±0.088)U/L 比(0.431±0.057)U/L,t=11.958,P＜0.01];在应用不同浓度的大黄素作用TPC-1细胞后出现与Gal-3 siRNA干扰后相似的结果,中、高剂量组中的Gal-3、PCNA 蛋白表达水平均低于对照组[Gal-3:(1.061±0.087)U/L 比(0.545±0.770)U/L 比(0.433±0.836)U/L,t=7.686、9.001,P＜0.01;PCNA:(0.879±0.052)U/L 比(0.561±0.036)U/L比(0.567±0.043)U/L,t=8.703、7.962,P＜0.01],ERS 相关的 Grp-78、PERK、CHOP 蛋白表达均高于对照组[Grp-78:(0.597±0.035)U/L 比(0.958±0.019)U/L 比(1.002±0.020)U/L,t=15.970、17.654,P＜0.01;PERK:(0.162±0.024)U/L 比(0.990±0.036)U/L 比(0.888±0.116)U/L,t=32.948、10.614,P＜0.01;CHOP:(0.165±0.038)U/L 比(0.954±0.065)U/L 比(0.874±0.110)U/L,t=18.290、10.521,P＜0.01].结论 大黄素可以通过抑制Gal-3蛋白表达减弱TPC-1细胞的增殖能力,诱导细胞的内质网应激.