PGC1a通过miR-23a抑制成肌细胞炎症因子分泌减少废用性肌肉萎缩

目的 研究PGC1a通过miR-23a抑制成肌细胞炎症因子分泌减少废用性肌肉萎缩的相关机制.方法 40只野生型小鼠随机平均分为空白对照组(Control组)、生理盐水+后肢神经固定组(Immobilization组)、过表达PGC1a+后肢神经固定组(OE-PGC1a+Immobilization组)和抑制PGC1a+后肢神经固定组(Sh-PGC1a+Immobilization组).检测小鼠肌肉组织细胞大小、肌萎缩标志基因Atrogin-1和MuRF-1,以及TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8等炎症因子和神经营养因子NT-3的表达.进一步采用生物信息学方法预测PGC1a与miR-23a的上游启动子区域存在结合潜能,并用染色质免疫共沉淀确证.在成熟肌管细胞中转染过表达和抑制PGC1a慢病毒,检测miR-23a与炎症因子表达变化.在成熟肌管细胞中转染miR-23a mimic和miR-23a inhibitor后观察炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8表达变化.结果 Immobilization组小鼠肌肉组织中PGC1 a相对表达水平显著高于Control组(P＜0.05).过表达PGC 1 a抑制小鼠肌肉组织中肌肉萎缩标志基因Atrogin-1和MuRF-1表达(P＜0.05),使肌肉组织细胞增大(P＜0.05),并在整体上抑制肌肉组织中炎症因子表达(P＜0.05).反之抑制PGC1a后,小鼠肌肉组织中肌肉萎缩标志基因Atrogin-1和MuRF-1表达升高(P＜0.05),肌肉组织细胞变小(P＜0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平均上升(P＜0.05).免疫共沉淀结果显示,PGC1a可以结合miR-23a启动子区域(P＜0.05),RT-PCR结果显示,PGC1a促进miR-23a表达,后者可抑制炎症因子分泌(P＜0.05).结论 PGC1a通过miR-23a抑制成肌细胞炎症因子分泌减少废用性肌肉萎缩.