鱼肉制品中龙利鱼和巴沙鱼的鱼源性成分的双重实时荧光PCR快速检测法

目的 建立龙利鱼和巴沙鱼源性成分的双重实时荧光聚合酶链式反应(PCR)快速检测方法.方法 根据13种龙利鱼的线粒体16S rRNA序列,设计通用引物和探针,根据巴沙鱼的线粒体cytb基因序列设计引物和探针,通过优化扩增反应体系进行双重实时荧光PCR扩增,达到快速检测产物的目的.结果 本方法特异性良好,龙利鱼基因组DNA灵敏度可达到10-3ng,在与鲤鱼粉混合的鱼肉制品中可检测,质量分数灵敏度达到1％.巴沙鱼基因组DNA灵敏度可达到10-4ng,在与龙利鱼粉、大西洋鳕鱼粉混合的鱼肉制品中均可检测,质量分数灵敏度达到0.1％,在与米粉混合的鱼肉制品中可检测,质量分数灵敏度达到0.001％.结论 本方法检测特异性高、所需时间短、灵敏度高,可满足鱼肉制品中龙利鱼真伪鉴别和巴沙鱼掺假的检测要求.