核酸-免疫层析法快速检测肠道侵袭性大肠埃希氏菌

目的 建立快速检测肠道侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)的核酸-免疫层析方法.方法 利用不对称聚合酶链式反应技术制备目标单链DNA,结合免疫层析技术分型检测EIEC的毒力基因invE和大肠埃希氏菌标志基因uidA.结果 在不对称PCR体系中,uidA和invE最佳上下游引物比例为1 ∶3,最佳引物浓度(下游)分别为0.2 μmol/L和0.25 μmol/L,最佳扩增循环次数为40.本方法最低检测限为3.97×10-3 ng/μL的基因组DNA,特异性与PCR-凝胶电泳法相当.结论 本方法具有操作简便、快速、成本低、检测结果准确以及特异性良好等优点,可分型检测EIEC、非EIEC大肠埃希氏菌和非大肠埃希氏菌,适用于基层实验室使用.