生理性周期性张应变通过激活AMPK磷酸化抑制血管平滑肌细胞迁移

目的 探讨细胞能量代谢的关键调节因子AMP激活的蛋白激酶AMPK在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)响应生理性周期性张应变力学刺激后对VSMCs迁移的影响.方法 采用Flexcell-5000T体外细胞张应变加载系统,对大鼠原代培养的VSMCs施加10％幅度、1.25 Hz频率的周期性张应变,模拟VSMCs在体内的生理性力学环境;以未加载周期性张应变的静态细胞为对照组,Western blotting检测VSMCs的p-AMPK蛋白表达;划痕实验检测VSMCs迁移功能.结果 与静态组的细胞相比,生理性周期性张应变加载24 h后显著减少划痕愈合面积,提示生理性周期性张应变抑制VSMCs迁移;生理性周期性张应变加载3 h后,VSMCs的p-AMPK蛋白表达显著升高,而加载24 h后p-AMPK蛋白表达显著降低.在生理性周期性张应变加载条件下,孵育AMPK抑制剂可以在张应变加载3 h后显著降低p-AMPK蛋白表达,而在张应变加载24 h后显著促进VSMCs迁移;在静态条件下孵育AMPK激活剂AICAR 3 h后显著诱导p-AMPK蛋白表达,孵育24 h后显著抑制VSMCs迁移;提示p-AMPK蛋白表达参与调控VSMCs迁移.结论 生理性周期性张应变能通过激活p-AMPK蛋白表达,进而抑制VSMCs迁移,提示生理性周期性张应变调控VSMCs迁移对维持血管稳态具有重要意义.