苯甲酰乌头原碱对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞凋亡、炎症因子的影响

目的:探究苯甲酰乌头原碱(BAC)对类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)凋亡、炎症因子的影响及具体凋亡机制,为RA的临床治疗提供参考.方法:募集24例高度活动期RA患者(DAS28评分>5.1分),同期纳入性别、年龄匹配的16例健康体检者为正常对照组(HC组).采用梯度离心法分离PBMC;分别检测加药前及最终质量浓度为0,150,300μmol·L-1 BAC干预RA组、HC组PBMC细胞24 h后,实时荧光定量PCR与Western blot法检测细胞中凋亡相关基因及蛋白的表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养液中炎症因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果:RA组PBMC细胞中Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量增加,Bax、Caspase-3/Cleaved Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量减少,与HC组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).加入BAC干预后,150,300μmol·L-1 BAC加药组PBMC凋亡率增加,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).150,300μmol·L-1 BAC加药组PBMC中Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量明显降低,Bax、Caspase-3/Cleaved Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量明显增加,与0μmol·L-1 BAC组比较,除150μmol·L-1 BAC组Bax mRNA和蛋白表达外,其余差异均有统计学意义(P<0.05).同时BAC可以降低PBMC培养液中的炎症因子IL-1、IL-6、IL-17、TNF-α水平,300μmol·L-1 BAC组最为显著,与0μmol·L-1 BAC组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:RA患者血清中炎症因子IL-1、IL-6、IL-17、TNF-α水平升高,PBMC凋亡减少,BAC可能通过Bcl-2/Bax、Caspase-3途径诱导PBMC细胞凋亡,并能降低PBMC中炎症因子水平.